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產品目錄
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ANNEXIN V-FITC/PI 凋亡檢測試劑盒
物品單位 價格 品牌
20T 680 solarbio
  • 產地:北京
  • 貨號:CA1020
  • 發布日期: 2019-03-25
  • 更新日期: 2020-03-05
產品詳細說明
產地 北京
品牌 solarbio
貨號 CA1020
保存條件
英文名稱 ANNEXIN V-FITC/PI
CAS編號
保質期 1年個月


產品說明:

細胞凋亡是細胞的基本特征之一,在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面都起到 十分重要的作用。Annexin V 是一種分子量為 35.8 KD 的 Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡 過程中翻轉到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)高親和力特異結合。FITC-Annexin V 結 合到凋亡細胞后,在藍色光的激發下,發出綠色熒光,區分出凋亡細胞與正常細胞。碘化丙啶 (Propidium iodide,PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細胞膜,但對凋亡晚期細胞和死細胞的 破損細胞膜能夠穿透,并使細胞核紅染。將 FITC-Annexin V 與PI 匹配使用,可以將凋亡早期的細 胞和晚期的細胞區分開來。 :

操作步驟

1、 用 27ml 的去離子水稀釋 3ml Binding Buffer(10×)至 30ml,每次用 3ml。

2、 收集細胞(1×106 個/次),然后用冷的 PBS 洗滌。(對于貼壁細胞,先用胰酶消化,再用 PBS 洗 滌)。

3、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 懸浮細胞,300×g 離心 10min,棄上清。

4、 用 1ml 1×的 Binding Buffer 重懸細胞,使細胞的密度達到 1×106 個/ml。

5、 每管加入 100μL 細胞(1×105 個)。

6、 再向管中加入 5μL Annexin V-FITC。

7、 室溫,避光,輕輕地混勻,10min。

8、 加入 5μL PI,室溫,避光,孵育 5min。

9、 加入 PBS 至 500μL,輕輕混勻。

10、在 1 小時內用流式細胞儀檢測。

注意事項

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。

2、Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物質,在保存與操作時請注意避光。

3、Propidium iodide(PI)能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用。

4、在細胞洗滌的*一步,請盡量將上清棄凈,以免 PBS 殘留影響實驗結果。 產品內容: CA1020-20 CA1020-50 CA1020-100 保存 Annexin V-FITC 100μl 250μl 500μl 4°C,避光,不要冷凍 Propidium iodide(PI) 100μl 250μl 500μl 4°C,避光,不要冷凍 Binding Buffer(10×) 6ml 15ml 30ml 4°C 保存,長時間-20°C

5、PI 染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首先進行 Annexin V-FITC 染色,上機前 5 分鐘再加入PI 染色。

6、整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在 4℃下操作。

7、反應完畢后請盡快檢測,因為細胞凋亡是一個動態的過程,反應 1 小時后熒光強度就開始衰變。

8、成功的檢測凋亡受以下幾種因素的影響,如細胞類型、細胞膜上 PS 的密度、發生凋亡時 PS 翻 轉的比例、誘導細胞凋亡的方法、所用試劑、誘導凋亡的時間等,把這些影響因素進行優化對實驗 成功是非常必要的。 此試劑盒僅供科研使用。


   

公司簡介 

     北京索萊寶科技有限公司 始創于 2000年, 是一家集 產品研發、生產、銷售、服務于一體的大型高科技生物企業。  公司總部位于北京,擁有1200平米研發生產中心,公司提供的產品近萬種,超過5000種常備現貨,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫學等相關領域,并不斷推陳新出擴充種類,為用戶提供優秀,專業的產品。  立足北京,輻射全國,隨著產品營銷戰略的不斷延伸,我們將逐步發展成為*的專業性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優勢和勇于進取的敬業精神,為中國生命科學研究的發展作出更多的貢獻。為了更好、更全面的發展,現公司正在誠招各地代理商,歡迎垂詢并期待您的加入! 

  

 

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